Uma série de produtos especialmente concebidos para selos de reações imunofluorescentes, com uma fórmula única que permite que a fluorescência dos corantes não diminua mais.Os comprimidos anti-fluorescente usados ​​sãodo AF1edo AF2edo AF3edo AF4eAF87edo AF100edo AF200edo AF300eO CFM-1eO CFM-2Espera um pouco. Alguns desses produtos contêmDAPI,Nucleos celulares ou revestimentoDNAExperiência.

No que diz respeito aos extintores anti-fluorescentes, os três tipos comuns são: o ácido propílico de fenolGalato de n-propilo (NPG)Parafenaminas de tipo amínicop-Fenilendiamina (PPD)de tipo amino.1,4-Diazabiciclo-octano（DABCO(Trietilendiamina). A teoria básica da extinção de fluorescência é a seguinte: o oxigênio dissolvido comum em cortes de tecido no estado de excitação se torna oxigênio monolinear, oxigênio monolinear semelhante a radicais livres de oxigênio, esta coisa é a principal causa da extinção de fluorescência, adicionamos o agente anti-extintor principalmente reagindo com este causante, limpando diretamente o oxigênio monolinear. Observe que a adição de anti-extintor ao comprimido tende a reduzir a quantidade total de fluorescência na fase primária da excitação, e também comDNARiscos associados a reações de tintura. Veja as vantagens e desvantagens desses três agentes:PPDPode reagir com os corantes (especialmenteCy2Portanto, esse tipo de tintura não deve conterPPDos comprimidos;do NPGNão tóxico, coloração fluorescente de células vivas é preferido este tipo de vedante, masdo NPGHá alguma interferência no processo de apoptose celular, os colegas de estudo que realizam tais estudos devem prestar mais atenção e tentar evitar o conteúdodo NPGos comprimidos;DABCONão parece.PPDÉ tão eficaz e pouco tóxico que pode ser usado em células vivas, mas comdo NPGDa mesma forma, há interferência no processo de apoptose celular.

Uma grande quantidade de comprimidos empilhados aqui, como encontrar rapidamente o que você precisa? A ideia simples é:

Primeiro passo: coagulante ou não coagulante? É conveniente armazenar e recolher coagulação, considerando a contração do tecido durante o processo de coagulação e a contração que requer a etapa de desidratação. O tipo não-coagulante deve ser considerado como a volatilidade e a fuga lateral do vedante, é claro que é necessário cobrir o vidro (às vezes, também é necessário uma almofada de selagem de silicone)espaçadore muitas vezes a tampa também precisa ser selada, muitas vezes tinta de unhas, cera dentária,VALAP (mistura igual de vaselina, lanolina e parafina misturada em uma placa de aquecimento a 60°C)Aplique um pouco ao redor da lâmina da tampa, a lacquer das unhas leva mais tempo para secar e há risco de contaminar a lente; Cera dental pode curar mais rápido a temperatura normal;VALAP (mistura igual de vaselina, lanolina e parafina misturada em uma placa de aquecimento a 60°C)É comumente usado na fechamento de células vivas.

Passo 2: Preciso de glicerina (solúvel em água) ou não glicerina (solúvel em gordura)? A glicerina pode ser misturada em qualquer proporção de água e pode ser solúvel em etanol, mas não em óleo. Sabendo disso, é muito mais fácil escolher. Como é o seu sistema de reações químicas? Contém água, escolha glicerina (solúvel em água). Após o tratamento de desidratação rigorosa, escolher não glicerina (solúvel em óleo).

Terceiro passo, a taxa de refração do comprimido. Tinha a película com a taxa de refração de seleção do comprimido vedante em1．52para1．54Melhor transparência; O tecido não manchado é melhor selado com um vedante com alta ou baixa taxa de refração, que elimina a diferença esférica para obter a melhor imagem.

Introdução aos agentes de membrana utilizados:

Polietilanolpoli (álcool vinil): Polímero orgânico, não tóxico, solúvel em água, um agente de membrana comumente usado. Classificados em diferentes números de acordo com sua polimerização e solubilidade alcoólica, por exemplo:Mowiol ® 4-88- É.PVATambém podem ser adicionadas outras substâncias ou reações para tratamento modificado, por exemplo:Permafix-1É modificado.PVA- É.

Polietileno pirrolano(polivinilpirrolidona)Nome abreviadoPVPÉ um composto polimérico não iónico e também é um agente de membrana comumente usado.

Guia de compra de produtos:

l AF1:O ingrediente básico é a glicerina,PBSTampon, extintor antifluorescente, outros componentes, etc., taxa de refração1.46，PH10À esquerda e à direita, adequado para detectar cortes de tecido mergulhados em glicerina, células mortas, PEIXES (incluindo CARD-FISH)Espere o envelope.

l AF2:Os ingredientes básicos são glicerina, extintor antifluorescente, outros ingredientes, etc., sem tampão próprio. Taxa de refração1.47A vantagem deste produto é que não tem tampão próprio e pode ser compatível com qualquer outro tampão.

l AF3:Os componentes básicos sãoPBSTampon, extintor antifluorescente, outros componentes, taxa de refração1.34Especialmente aplicável ao teste de células vivas.

l AFR3:Os componentes básicos sãoPBSTampon, um último tipo de extintor antifluorescente (não aminonefenol), outros ingredientes, etc.

l AF4:Também chamadoMeio de montagem de glicerol/n-propilgalatoO agente de fechamento, o agente anti-fluorescente diminuído é adicionado sem ácido propílicoGalato de n-propilo (NPG)- É.

l AF87: O local especial é o que contém óleo impregnado sem fluorescência, que é especialmente concebido para a observação sob um espelho duplicado alto, paraDAPIColoração especialmente útilDAPIHá uma tendência à evacuação nos comprimidos de base de glicerina).

l AF100:Os componentes básicos sãoPBSTampon, anti-fluorescente, outros ingredientes, etc., este é um comprimido sem glicerina, que precisaCFPVOHSolução para uso conjunto. Precisa de pré-misturado AF100eCFPVOHSolução, com quanto misturar, depois de misturar10terminou em uma hora. A taxa de refração do comprimido1.34-1.35.

l AF200:comdo AF100Da mesma forma, a diferença é,do AF200É de glicerina.,Antifluorescente de tipo amino, adequado para encapsulamentos como anthocyanins, Alexa, Hoeches e outros.

l AF300:comdo AF100Da mesma forma, a diferença é,do AF300É um agente anti-fluorescente a base de glicerina.

l CFMA taxa de refração dos comprimidos da série é1.52É igual ou aproximado à taxa de refração do vidro de suporte e tampa usado, o que é útil para obter a imagem perfeita. É usado principalmente sob microscópio confocal a laser, ou quando o hiperscópio precisa ser submerso em óleo para substituir a imersão em óleo.O CFM-1deO pHAproximadamente6.5，.CFM-1 mais antifadentedeO PHValor aproximado10，O CFM-2depH deAproximadamente~8.5，O CFM-3deO PHValores quase neutros.

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